-
Tris又叫三羥甲基氨基甲烷。是一種白色結(jié)晶或粉末，溶于乙醇和水，微溶于乙酸乙酯、苯，是一種有刺激性的化學(xué)物質(zhì)。其本身有很高的緩沖能力，在水中溶解度高，對(duì)很多酶呈惰性反應(yīng)，它的這一特性使得Tris成為用于許多生化目的非常滿(mǎn)意的緩沖液。用于穩(wěn)定反應(yīng)體系的pH，在pH7.5-9.0之間有較強(qiáng)的緩沖能力。其緩沖液的低離子強(qiáng)度特點(diǎn)可用于線(xiàn)蟲(chóng)核纖層蛋白的中間纖維的形成。其本身也是蛋白質(zhì)電泳緩沖液的主要成分之一。此外還是制備表面活性劑、硫化促進(jìn)劑和一些藥物的中間物。熒光PCR凍干體系優(yōu)化...
查看更多
-
多元醇類(lèi)凍干保護(hù)劑包括甘油、甘露醇、山梨糖醇、肌醇、木糖醇、叔丁醇、側(cè)金盞花醇等，這一類(lèi)凍干保護(hù)劑是比較常用較為普遍的凍干保護(hù)劑。以甘油作為凍干保護(hù)劑來(lái)介紹一下在蛋白質(zhì)凍干中的作用。甘油具有良好的滲透能力，可以進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部和胞內(nèi)大分子形成氫鍵以取代干燥脫除的水分，從而維持蛋白質(zhì)、碳水化合物及脂肪等大分子活性物質(zhì)的原有結(jié)構(gòu)。此外，甘油還可以起到降低細(xì)胞脫水皺縮和緩解復(fù)水腫脹的效果。另外醇和糖類(lèi)相似均具有醇和糖類(lèi)羥基官能團(tuán)，均能產(chǎn)生“優(yōu)先水化作用”以及改變體系的玻璃態(tài)轉(zhuǎn)變溫度等，...
查看更多
-
二糖又名雙糖,雙糖是碳水化合物的一種。它是由兩個(gè)單糖分子經(jīng)縮合反應(yīng)除去一個(gè)水分子而成的糖。例如乳糖由葡萄糖和半乳糖組成，蔗糖由葡萄糖和果糖組成，麥芽糖由兩個(gè)葡萄糖組成等。二糖作為常用的凍干保護(hù)劑，能夠有效增加蛋白凍干穩(wěn)定性，但是用它們作保護(hù)劑得到的無(wú)定形蛋白凍干固體具有較低的Tg，對(duì)儲(chǔ)存過(guò)程中的高溫和高濕條件耐受較差。大分子量糖能夠增加凍干后固體的Tg，增加凍干后穩(wěn)定性，但是對(duì)于低濃度蛋白活性保護(hù)作用不理想。例如蔗糖對(duì)蛋白質(zhì)具有保護(hù)作用，葡聚糖在冷凍和干燥過(guò)程中不能防止蛋白質(zhì)...
查看更多
-
聚合物又稱(chēng)加聚物。由一種單體經(jīng)聚合(加聚)反應(yīng)而成的產(chǎn)物。分子具有重復(fù)的結(jié)構(gòu)單位。包括晶態(tài)結(jié)構(gòu)、非晶態(tài)結(jié)構(gòu)、取向態(tài)結(jié)構(gòu)以及織態(tài)結(jié)構(gòu)。聚合物包括聚乙二醇、PVP、明膠、聚乙烯亞胺等。聚合物常用作為蛋白質(zhì)的冷凍保護(hù)劑，通常聚合物的穩(wěn)定作用取決于聚合物的多重性質(zhì),如優(yōu)先從蛋白質(zhì)表面析出、表面活性、使蛋白質(zhì)溶液私度升高從而阻止其他小分子(如糖及多輕基化合物)的結(jié)晶、抑制冷凍過(guò)程中pH值的劇烈變化等。不同聚合度及濃度的聚合物所提供的保護(hù)作用不同,如聚合度大的PvP有著較高的玻璃化溫度,...
查看更多
-
氨基酸是含有氨基和羧基的一類(lèi)有機(jī)化合物的通稱(chēng)。目前發(fā)現(xiàn)的天然氨基酸就有300多種，基本氨基酸也有二十個(gè)品鐘。氨基酸應(yīng)用于食品行業(yè)、醫(yī)藥行業(yè)、化妝品行業(yè)等。氨基酸是常見(jiàn)的蛋白質(zhì)保護(hù)劑之一。在冷凍過(guò)程中,低濃度的甘氨酸可通過(guò)抑制10或100mmol/L磷酸緩沖鹽結(jié)晶所致pH值的改變而阻止蛋白質(zhì)藥物變性。無(wú)定型甘氨酸可阻止凍干過(guò)程中重組人生長(zhǎng)激素的聚集;結(jié)晶型甘氨酸能升高成品的塌陷溫度,阻止因塌陷而引起的蛋白質(zhì)藥物的破壞。常用的氨基酸類(lèi)蛋白質(zhì)保護(hù)劑有脯氨酸、谷氨酸鈉、丙氨酸、甘氨酸...
查看更多
-
熒光PCR的探針?lè)ǚ譃槿蚪M核酸探針、克隆探針、寡核苷酸探針、單鏈RNA探針、cDNA探針、蛋白質(zhì)探針以及酶探針。帶大家一起了解下寡核苷酸探針、cDNA探針、RNA探針的特點(diǎn)。寡核苷酸探針特異性較高，區(qū)別染色體上一個(gè)堿基的突變；由于其鏈短，分子量小，雜交時(shí)間較短（僅需1-2小時(shí)），可預(yù)測(cè)雜交條件，可直接利用DNA序列人工合成獲得特異片段而無(wú)需分子克隆，獲得探針相對(duì)容易。但是由于其鏈短致使標(biāo)記率較低，也影響了檢測(cè)的敏感性，僅能檢出含很少的標(biāo)本。cDNA探針以RNA為模板，用反...
查看更多
-
二甲基亞砜（DMSO）是一種有機(jī)化合物，常溫下為無(wú)色無(wú)臭的透明液體，是一種吸濕性的可燃液體。具有高沸點(diǎn)、熱穩(wěn)定性好、與水混溶的特性。可作有機(jī)溶劑、反應(yīng)介質(zhì)和有機(jī)合成中間體。也可用作合成纖維的染色溶劑、去染劑、染色載體,以及回收乙炔、二氧化硫的吸收劑。二甲基亞砜是一種既溶于水又溶于有機(jī)溶劑。廣泛用作溶劑和反應(yīng)試劑，具有很高的選擇抽提能力。二甲基亞砜是如何應(yīng)用的呢？下面簡(jiǎn)單介紹下，DMSO是一種重要的滲透型細(xì)胞保護(hù)劑。培養(yǎng)液中DMSO濃度為10%時(shí)，細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率近100%；1‰...
查看更多
-
甲酰胺是一種化合物，無(wú)色透明液體，略有氨味，是合成醫(yī)藥、香料、染料等的原料，也可作為溶劑用于合成纖維的抽絲、塑料加工、木質(zhì)酪素墨水的生產(chǎn)等。通過(guò)甲酸甲酯和氨的反應(yīng)制備甲酰胺的方法。甲酰胺是可作為溶劑、有機(jī)合成原料、醫(yī)藥原料等的在工業(yè)上有用的物質(zhì)。甲酰胺是被較早發(fā)現(xiàn)并應(yīng)用的PCR凍干保護(hù)劑之一，能促進(jìn)引物模板退火，能提高PCR反應(yīng)的特異性。分享下熒光PCR試劑凍干的示例：(1)將熒光PCR擴(kuò)增緩沖液、引物、探針、熱啟動(dòng)Taq酶、UNG酶、dATP、dGTP、dCTP、dTTP、...
查看更多
